Proteolyse/fibrinolyse og oligoklonale bånd i cerebrospinalvæsken - baggrunden for projektet Projektansvarlig: Læge Eva Funding og Afdelingslæge Ph.d. Anna-Marie Bloch Münster Klinisk Biokemisk Afsnit Sydvestjysk Sygehus Esbjerg Afdeling for Tromboseforskning Institut for Sundhedstjenesteforskning Syddansk Universitet

Fibrinolyse i den hæmostatiske balance Koagulation Fibrinolyse Protrombin Plasminogen Overfladeinduceret, Intern ( FXII) FXa t-PA PAI-1 u-PA Vævsinduceret, Ekstern (FVII, TF) Trombin Plasmin Fibrinogen Fibrin Fibrin-degraderings produkter Astrup T. Thrombosis et Diath Haemorrh 1958; 2:347 Sidelmann JJ et al. Sem Thromb hemost 2000;26:605-18

Fibrinolyse ved inflammation Astrup T. Lancet 1956; 11:565 Illustration: Department of Pathology - University of Utah - Salt Lake City, Utah

Proteolyse i CNS Neurogenese og synaptisk remodellering Neuron Astrocyt Karvæg Plasminogen Plasminogen Fibrin(ogen) Blodhjernebarriere Endothel Basalmembran Fodprocesser u-PA Neuroserpin PAI-1 t-PA Proteolyse af ekstracellulær matrix Plasmin Gingrich MB et al.Trends Neuroscience 2000; 23:399-407

Proteolyse i CNS ved akut og kronisk inflammation Neuron Astrocyt Karvæg Myelin Oligodendrocyt Plasminogen Proteolyse af myelin u-PA t-PA Plasmin Proteolyse af ekstracellulær matrix Kaur J et al. J Cereb Blood flow Metabol 2004; 24:945-63

Proteolyse i CNS ved akut og kronisk inflammation Neuron Astrocyt Karvæg Fibrin TF t-PA Plasmin Proteolyse af basalmembran MMP-9 u-PA – u-PAR Vasoaktiv Levi M et al. Cardiovasc Res 2003; 60: 26-39 Kaur J et al. J Cereb Blood flow Metabol 2004; 24:945-63

Multipel sclerose Perivaskulær inflammation og demyelinisering Neuron Astrocyt Karvæg Cerebro- spinalvæske T-lymfocyt Cytokiner C Oligoklonale bånd Makrofag B-lymfocyt Antistoffer Y Y Y Peterson JW et al. Neurol Clin 2005; 23:107-29. Y

Proteolyse/fibrinolyse ved EAE Eksperimentiel allergisk encephalomyelitis Forløb af EAE Forløb af EAE ved behandling med AMCA Grad af symptomer 3 2 1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Dage Blodhjernebarriere Fibrinophobning → Fibrinolyse/proteolyse Koh et al. J Neuroimmun 1993;47:141-6. Cell immun 1987;107:52-63

Proteolyse/fibrinolyse ved Multipel sclerose Cerebrospinalvæske: Plasminogen koncentration t-PA aktivitet u-PA aktvitet Genetik: PAI-1 5G/5G genotype → nedsat transcription af PAI-1 → øget hyppighed af Multipel sclerose hos kvinder Akenami FOT et al. Fib Prot 1997; 11:109-13 Akenami FOT et al. Fib Prot 1999; 13:99-103 Luomala M et al. Neurology 200; 54.1862-4

Proteolyse/fibrinolyse og EAE Experimentiel autoimmun encephalomyelitis Forløb af EAE Forløb af EAE hos t-PA knockout rotter Grad af symptomer 4 3 2 1 10 20 30 40 50 Dage Lu et al, J Neuroscience 2002; 22:10781-9

TNF-transgene fibrinogen- knockout mus Fibrinolyse/proteolyse hos TNF- transgene mus TNF-transgene fibrinogen- knockout mus TNF-transgene mus Fibrin Celler Demyelinisering Akassoglou K et al.PNAS 2004; 101:6698-703

Proteolyse/fibrinolyse i hjernevæv ved Multipel sclerose Fibrin er lokaliseret til demyeliniserede axoner sammen med t-PA t-PA aktivitet PAI-1 antigen Fibrinolyse Gveric D et al. Brain 2001;124:1978-88 Gveric D et al. Brain 2003; 126:1590-8

Proteolyse/fibrinolyse ved Multipel sclerose Høj fibrinolytisk aktivitet Proteolyse af blodhjernebarriere og myelin Cellemigration Lav fibrinolytisk aktivitet Fibrinophobning Nedsat regeneration Nedsat remodellering Tid

Mutipel Sclerose Diagnose Klinik: Neurologiske udfald Billediagnostik: MR-scanning af cerebrum Nerveledningshastighed : VEP og SEP Lumbalpunktur: Oligoklonale bånd Proteolyse/fibrinolyse

Proteolyse/fibrinolyse og oligoklonale bånd i cerebrospinalvæsken Formål At undersøge cerebrospinalvæske mhp: Oligoklonale bånd overfor fibrinolyse Oligoklonale bånd overfor inflammation og fibrinolyse Fibrinolyse overfor flowcytometrisk profil af lymfocytter og diagnosen Multipel sclerose