Fiskebakterier og fiskesundhed Jesper Bartholin Bruhn, Danmarks Fiskeriundersøgelser

Baggrund Fisk fra akvakultur leverer i dag omkring 30% af fisk til konsum Produktionen er meget intensiv og bakterielle sygdomme spredes hurtigt på produktionsstederne Hvis stigningen i akvakultur skal forsætte skal vi kunne kontrollere disse sygdomme FAO (2005): The State of World Fisheries and Aquaculture (SOFIA) 2004.

Baggrund Antibiotika kan anvendes til at forhindre bakterielle infektioner Udvikling af resistens hos de fiskepatogene bakterier kan være et problem Vaccinationer kan anvendes med meget stor succes Vaccinationer kan ikke anvendes til fiskelarver og skaldyr En alternativ metode kunne være anvendelse af probiotiske mikroorganismer

Definition af probiotisk Anvendelsen af levende mikroorganismer som ved tilsætning i tilstrækkelig mængde giver en forbedret overlevelse af en vært

Stolt Sea Farm Stolt Sea Farm (SSF) producerer 2500 tons pighvar om året Pighvar er en yndet men meget dyr spise SSF har problemer med bakterielle fiskesygdomme http://www.stoltseafarm.com/

Produktion af Pighvar Hjuldyr Æg alger larver Artemia gær Små fisk Stor fisk

Formål Isolere probiotiske bakterier fra Stolt Sea Fram Karakterisere disse Kan disse bakterier hjælpe SSF mod infektioner af fiskepatogene bakterier

Metoder til at finde probiotiske bakterier Replika plating: Finde probiotiske bakterier Marine agar Plade med indstøbt Vibrio anguillarum Brøndeassay: Måling af antibakterielle stoffer

Hvordan finder man probiotiske kulturer? Prøver sås ud på MA Aftrykkes på Vibrio anguillarum-plade Renkultur af bakterien isoleres og testes igen for hæmning af den fiske-patogene bakterie

Identificere probiotiske bakterier fra SSF Identifikation af 32 stammer med antagonistisk aktivitet mod fiske patogene bakterier: 15 Roseobacter spp. Gram-negative, marine Slår ikke larver ihjel 17 Vibrio spp. Dræber larver (!) Hjelm et al. 2004 SAM

Roseobacter på Stolt Sea Farm Sample # samples with # potential probionts Total Clear zones Plates with antagonists Vibrionaceae Roseobacter Tank wall 28 17 15 99 9 82 Tank water 14 11 2 23 Larvae, rotifers 19 8 5 29 16 13 Larvae, Artemia 4 3 12 Larvae, R+A 1 Artemia 22 Rotifers 135 51 36 174 31 132 Hjelm et al. 2005 AEM

Probiotic effect of Roseobacter Roseobacter har en beskyttende effekt på larver inficeret med Vibrio anguillarum Planas et al. 2005

Hvad hæmmer Vibrio? Roseobacter 27-4 producere et brunt pigment Der er en sammenhæng mellem pigment og antibakteriel aktivitet Tropodithitic acid (TDA) er det aktive stof Bruhn et al 2005

Formål 2 Hvordan skal vi tilsætte Roseobacter til Stolt Sea Farm? Er der specielle vækstforhold der kan fremme produktionen af antibakterielt stof

Vækstforhold påvirker antibakteriel aktivitet Roseobacters vækst er meget påvirket af omrystning Når den ikke omrystes vokser den som en stjerneform Vokser under omrystning som enkelte celler Bruhn et al 2005

Scanning electron microscopy (SEM) Andre producere også rosetter Bruhn et al 2005

Stjernerne påvirker biofilm! Stille Ryst Bruhn et al 2006

Opsamling Den probiotiske Roseobacter kan isoleres fra overflader på SSF Den kan hæmme fiskepatogene bakterier og reducere dødeligheden hos pighvarlarver Produktionen af antibakterielt stof hænger tæt sammen med vækstforhold Stillestående vækst forhøjer produktionen Tilsætning af Roseobacter i biofilm kan måske være en optimal