Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf. 48 225 300 • www.eanord.dk
Substrater Hvilke næringsstoffer behøver mikroorganismer? Substrattyper Hvordan fremstilles substrater? Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Næringsstoffer C-kilde N-kilde H-kilde O-kilde P og S-kilde Salte: Fe, Mg, Na, K, Zn mm. Vitaminer og andre vækststoffer Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

C-kilde Kulhydrater f.eks. Glucose Stivelse Saccharose Fedtstoffer bruges knap så meget Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

N-kilde Proteiner Nedbrudt protein – pepton, trypton Aminosyrer NH4-salte Urinstof NO3 mm. Samtidig dækkes ofte en del af C-behovet. Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

H og O-kilder Der tænkes sjældent specifikt på disse grundstoffer, da de automatisk følger med i kulhydrater og protein. Vand og evt. tilførsel af O2 sørger for resten af behovet. Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

P og S-kilder Phosfor indgår i cellemembraner og DNA. Svovl er en vigtig bestandel i visse aminosyrer. Behovet dækkes ved tilsætning af Phosfater og Sulfater (som salte) Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Fe, Mg, Na, K, Zn m.fl. Mange enzymer bruger specielle metalioner som Co-faktor. De vigtigste metaller tilsættes direkte som salte, de øvrige kommer ofte med ved at bruge billig kvalitet af salte (som indeholder de øvrige stoffer som urenheder) Undertiden tilsættes en speciel sporstofblanding Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Vitaminer og andre vækststoffer
Mange mikroorganismer er afhængig af vitaminer eller andre vækstsstoffer. Man kan berige sit substrat f.eks. ved tilsætning af gæreketrakt, maltekstrakt eller blod Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Substrattyper Flydende substrater kaldes også for bouilloner eller broth. Halvflydende med lidt agar i Faste substrater med mere agar i. Agar er et kulhydrat, som udvindes fra alger. Stort ingen mikroorganismer kan nedbryde det. Det smelter ved 100 oC og størkner ved ca. 40 oC Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Substrattyper, fortsat
En anden måde at inddele substrater er efter specielle indholdsstoffer: Grundsubstrater – indeholder basisstofferne og ikke mere Berigede substrater indeholder derudover også stoffer der fremmer væksten f.eks. gærekstrakt eller blod Selektive substrater indeholder stoffer som hæmmer nogle eller de fleste mikroorganismer, f.eks antibiotika Indikative substrater indeholder stoffer som ved nedbrydning kan vise en bestemt biokemisk reaktion, f.eks. Et kulhydrat + pH indikator Syntetiske substrater (kemisk veldefinerede) indeholder kun stoffer, der kan købes som rene kemikalier. F.eks. Nacitrat og andre salte Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Substratfremstilling
De fleste substrater kan købes som pulver, der opløses i vand. Her ses PCA (Plate Count Agar) som er et universalsubstrat til bakterier Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Mærkning Ved afvejning noteres batchnr. på bøtten. Typisk findes specielle blanketter til denne dokumentation Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Mærkning Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Opskrift Indholdsstoffer og opskrift står som regel også på emballagen, ellers må man kigge i relevante bøger. Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Afvejning Ved afvejning bruges en teknisk vægt evt. åndedrætsværn idet støvet kan være allergifremkaldende Der afvejes i en vejebåd eller direkte ned i flasken/gryden Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Udsugning Udsugning er en anden mulighed, men suget påvirker ofte vægten. Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Kvældning Substratet tilsættes ionbyttet vand og står i ca. 10 min og kvælder (=optager vandet) Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Opvarmning Substratet opvarmes derefter under omrøring til agaren er opløst, hvilket sker tæt ved 100 oC Ofte er det unødvendigt at koge substratet, det er tilstrækkeligt med autoklavering Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Justering af pH pH i substratet kontrolleres og justeres om nødvendigt med henholdsvis HCl eller NaOH f.eks. 1 M Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Påfyldning Substratet hældes på flasker eller rør Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Påfyldning på rør Ved store produktioner kan bruges en pumpe, der dosserer et bestemt volumen i hvert rør Ellers bruges håndsprøjte eller pipette Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Mærkning Flaskerne forsynes med etikette, som refererer til en bestemt blanket i substratmappen med arbejdssedler (findes i biolab) Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Autoklavetape Autoklavetape er en kontrol på om substratet er blevet autoklaveret. Der sættes autoklavetape på flasken (IKKE på låget) Så kan man se om substratet er autoklaveret. (de lyse streger bliver mørke efter korrekt autoklavering)

Pakning af rør Rørene samles i en autoklavepose og forsynes med autoklavetape + etikette Man kan senere (efter autoklaveringen) placere posen i en kurv og flytte etiketten til kurven, som vist på billedet Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Autoclavering Se PP ”Betjening af autoclaver” Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Støbning af plader Ofte støbes pladerne umiddelbart efter autoklavering. Substratet skal dog lige tempereres først i et vandbad stillet til ca. 45 oC Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Støbning af plader

Undgå luftforurening Pladerne støbes helst i LAF-bænk (her er sterilt) Støbes udenfor LAF-bænk er en bunsenbrænder påkrævet (her skabes et aseptisk område) Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Lignende præsentationer

Præsentationer af emnet: "Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •"— Præsentationens transcript:

Lignende præsentationer

Om projektet

Feedback

Log ind

Logge ind via sociale netværk:

Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •

Lignende præsentationer

Præsentationer af emnet: "Peder Oxes Allé 4 • 3400 Hillerød •Tlf •"— Præsentationens transcript:

Lignende præsentationer

Om projektet

Feedback