Sammenligning af 25-hydroxyvitamin D3/D2 – Roche Modular E, DiaSorin Liaison og to LC-MS/MS metoder Anne Schmedes Klinisk Biokemisk Afdeling Vejle Sygehus anne.vibeke.schmedes@vgs.regionsyddanmark.dk
Prøver i sammenligningen Prøve nr. 1 – 20: Linearitetskurve Høj prøve (ca. 200 nmol/L) fortyndet i forskellige forhold med lav prøve (ca. 20 nmol/L) til kurve med 10 punkter Høj prøve kunne ikke findes – derfor spiket prøve Prøve nr. 21 – 40: Prøver med 25-OH-D2 20 pools fremstillet af Carsten Højskov med hjælpere på Århus Sygehus
Prøver i sammenligningen Prøve nr. 41 – 120: 80 pools i niveaer fra < 10 nmol/L til ca. 130 nmol/L Prøve nr. 121 – 150: 10 ens pools i 3 niveauer, dvs. 3 x 10 prøver. Skulle fordeles over 5 serier (helst) 3 3
Linearitet
Linearitet
Prøver med 25-OH-D2
Prøver med 25-OH-D2
Prøver med 25-OH-D2 Århus resultater 19,7 21,9 23,3 25,5 25,6 26,2 27,6 28,2 28,7 30,8 31,8 32,9 35,6 38,0 38,7 41,8 43,4 43,7 44,7 46,8 52,6 Århus resultater
Sammenligning af pools
Sammenligning af pools
Sammenligning af pools
Sammenligning af pools
Sammenligning af pools
Sammenligning af pools
Sammenligning af pools
Sammenligning af pools
Sammenligning af pools
Sammenligning af pools
3 x 10 ens prøver Lav pool Mean (nmol/L) S (nmol/L) CV % Diasorin 17,3 3,3 19,3 Roche 21,2 4,6 21,6 Vejle 18,5 3,9 21,1 Århus 21,8 3,2 14,5 Middel pool 43,8 6,3 14,4 47,8 4,8 10,0 51,7 4,1 7,9 58,2 4,4 7,5 Høj pool 75,1 8,7 11,6 73,0 5,1 7,0 92,4 5,7 6,2 108,3 16,5 15,3
Ekstern kvalitetskontrol
Ekstern kvalitetskontrol
Ekstern kvalitetskontrol Chromsystems, HPLC Diasorin IDS Recipe, HPLC Roche
Konklusioner 25-OH D2: Måling af 25-OH D2 er problematisk, og der findes ikke eksterne kontroller. De to LC-MS/MS metoder er meget uenige Sammenligningen har ikke kunnet eftervise, at DiaSorin medmåler 25-OH D2 mens Roche ikke gør Behandling med D2 vitamin er unødvendigt og en komplicerende faktor – og folk får alligevel for lidt
Konklusioner 25-OH D3: Vejle måler ca. 11 % lavere end Århus DiaSorin metoden måler 18 – 25 % for lavt i vores sammenligning + ”en parallelforskydning” på 4-7 nmol/L Roche metoden måler 19 – 27 % for lavt i vores sammenligning, dog fratrukket ”en parallelforskydning” på 8-10 nmol/L Spikede prøver kan af ukendte årsager ikke måles med de immunologiske metoder
Tak til DiaSorin og Roche for sponsorering af kit Carsten Højskov og kolleger fra Århus Sygehus for pools med D2 samt for at køre prøverne Marianne Sinding fra Diasorin for weekendarbejde med at køre prøverne i Køge, samt for diverse materiale Birgit Borggård fra Frederiksberg Hospital for at køre prøverne med Roche kittet Line Zanoni og Maha Alameddine for at køre prøverne med LC-MS/MS i Vejle KBA i Køge for at lægge Liaison apparatur til samt at køre nogle af prøverne med Diasorin kittet Lone Busekist fra Roche for mængder af materiale Søren Nielsen fra Herning for den gode vilje