Analysetekniske udfordringer i forbindelse med diagnosticering Hemostasedag på Gentofte Hospital Torsdag den 6. oktober 2011 Jens Peter Gøtze

Dagens udfordring: Let’s talk

Hæmofili Sjældne sygdomme Ofte god klinisk præsentation Stærke sammenhænge mellem klinik og outcome Biokemisk bekræftelse Kan have et akut behov Sandheden i laboratoriet: Mangelplasma

Von Willebrand sygdom Ikke sjælden Ofte uklar præsentation Mange subtyper Dårlig genetisk forståelse Kræver mange undersøgelser Bedste diagnostik er fælles klinisk og biokemisk vurdering

Erhvervet hæmofili Sjælden Uklar præsentation Kan kræve akut diagnostik Alle laboratorier kan lave første analyse Specifikke tests af antistof - i forbindelse med behandling Atypiske antistoffer – er atypiske

Trombosesygdomme Mange patienter Oftest mulitfaktoriel genese Udvalgte analyser bistår primært til risikovurdering Flere laboratorier må arbejde sammen No need for speed Hvilke markører er relevante?

Analysteknik Ofte uden sandhed i assays Bioassays og deres styrker/problemer Masser af medicin i spil Håndholdte analyser Need for speed – sometimes Forskellige assays – meget forskellige svar Centralisering

Medicin i koagulation Mange patienter Ikke simple sammenhænge på analyser, fraset INR Ny medicin Mangel på information Specifikke analyser for samme Diagnostik af patienter i pågående behandling

SFR udmelding Alle skal have et generelt analyserepertoire Hæmofili er højt specialiseret Trombofili er regionsfunktion LAKBA er for alle Patienter kommer på alle hospitaler

Kommunikation Vigtigt LABKA igen Harmonisering er vejen frem?

Brugere Generelle brugere Specialiserede brugere Afgørende med dialog

Hvorfor biokemi? Klinik over biokemi Risikovurdering: Virker det? Dårlige assays med problemer Uklare svar Leyden eksemplet Nihilisme

Trombotisk trombocytopenisk purpura, ADAMTS13 og von Willebrand faktor

Trombotisk trombocytopenisk purpura: først beskrevet i 1924 Arch. Internal Med.:1925; 36:89-93. *Read before the New York Pathological Society, Feb. 7, 1924

Trombotisk trombocytopenisk purpura FEBER TROMBOCYTOPENI MICROANGIOPATISK HÆMOLYTISK ANÆMI NYREFUNKTIONSNEDSÆTTELSE NEUROLOGISKE SYMPTOMER Incidens: ~4:1.000.000 Moschcowitz, 1924

Trombotisk trombocytopenisk purpura, ADAMTS13 og von Willebrand faktor 1924, TTP beskrives 1960, TTP responderer på plasma infusion (Upshaw-Schulman syndrom) 1982, UL vWF multimerer i plasma hos TTP patienter 1996, Påvisning af UL vWF proteolytisk aktivitet i plasma 1997, Mangel på proteolytisk aktivitet i plasma hos TTP patienter 2001, Identifikation af ADAMTS-13

Trombotisk trombocytopenisk purpura, ADAMTS13 og von Willebrand faktor 1924, TTP beskrives 1960, TTP responderer på plasma infusion (Upshaw-Schulman syndrom) 1982, UL vWF multimerer i plasma hos TTP patienter 1996, Påvisning af UL vWF proteolytisk aktivitet i plasma 1997, Mangel på proteolytisk aktivitet i plasma hos TTP patienter 2001, Identifikation af ADAMTS-13

ADAMTS13 Nature 413, 488-494(4 October 2001)

ADAMTS13 og von Willebrand faktor Jens Peter Gøtze

Trombotisk trombocytopenisk purpura, ADAMTS13 og von Willebrand faktor Andreas Hillarp

Trombotisk trombocytopenisk purpura Medfødt/arvelig ADAMTS-13 TTP Erhvervet/autoimmun TTP-lignende syndromer : HUS (hæmolytisk uræmisk syndrom) Graviditet Transplantation SLE Cancer DIC

Et halvnyt assay til diagnostik af ADAMTS13 mangel (FRETS-vWF73) Kokame, 2005 (Br. J. Haematol.)

Fluorescensudvikling i FRETS-vWF73 assay Kokame, 2005 (Br. J. Haematol.)

ADAMTS13 og TTP diagnostik Kokame, 2005 (Br. J. Haematol.)

Kvalitetskontrol af FRETS-vWF73 assay

Kvalitetskontrol af FRETS-vWF73 assay

ADAMTS13 målinger hos 151 patienter

Effekt af hæmolyse på ADAMTS-13 måling

Effekt af hyperbilirubinæmi på ADAMTS-13 måling

ADAMTS-13 i icterisk plasma P-ADAMTS-13 (arb.enh./l P-bilirubin (mmol/l)

ADAMTS-13 mangel – og hvad så? Antistoffer – funktionshæmmende/clearance ? Prognostisk betydning ? Familiemedlemmer ? Genetisk undersøgelse ? TTP versus HUS ? Moderat ADAMTS-13 nedsættelse ?

Slut og tak