Efteruddannelse i Bioteknologi Kursus A Plasmidoprensnning og Bgl II-skæring
Kursus indhold
Plasmid-oprensning Miniprep (1,5 mL kultur) – Minikolonne Silica Ionbytning – Extraktion med phenol Maxiprep – Samme som ovenfor, blot i stor skala
Plasmid-oprensning Miniprep: – 1,5 mL ON kultur af celler med plasmid – Høst – Lysis – NaOH denaturering – Neutralisering (Acetat og chaotroph salt) – Centrifugering (klaring af lysatet) – Adsorption til kolonnen – Vask (80% EtOH eller isopropanol) – Eluering med lav ionstyrke
Plasmid-oprensning
Restriktionsskæring
FastDigest enzymer Nye tider Almindelige enzymer – reaktionstid 1 time FastDigest – Reaktionstid 5 min! – Buffer indeholder farve og glycerol Kan loades på gel direkte efter inkubering!
Gennemgang af forsøgsvejledning Se i mappen