Efteruddannelse i Bioteknologi

Præsentationer af emnet: "Efteruddannelse i Bioteknologi"— Præsentationens transcript:

1 Efteruddannelse i Bioteknologi
Kursus A PCR af gDNA

2 Kursus indhold

3 PCR af plante gDNA Baseret på kittet: GAPDH/PCR Module PCR:

4 PCR

5 PCR

6 PCR

7 PCR

8 GAPDH Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase

9 Flere gener for ”samme” enzym

10 GAPDH GAPDH katalyserer reaktionen:
Glyceraldehyde-3-phosphate + NAD+ + Pi  1,3-bisphosphoglycerate + NADH + H+

11 I Arabidopsis

12 GAPDH tetramer

13 Primer design

14 Primer design Længde Smelte temperatur Tm Annealing temperatur
Tm = 2°C· (A+T) + 4°C· (G+C) Annealing temperatur Primer hairpins Primer dimers GC-clamp

15 PCR kloning

16 Degenerede primere Kendte sekvenser
Nye homologe gener med næsten ens sekvenser Primere som næsten passer Blandet population af primere

17 Primer design

18 Primer design

19 Primer design

20 Exonukleasebehandling
Nedbrydning af primere fra 1. runde PCR Enkeltstrengs nuklease Dobbeltstrenget PCR-fragment overlever

21 Nestede primere

22 Nestede primere

23

24

25 Gennemgang af forsøgsvejledning
Se i mappen