PAS farvning (Periodsyre-Schiff) Formål: Påvisning af PAS-positive elementer i væv
Fremgangsmåde: Afparaffinering 0,5% periodsyre 10 minutter Rindende vand 2 minutter Schiff’s reagens 15 minutter Rindende vand 5 minutter Mayers sure hæmatein 2 minutter Dehydrering
Fremgangsmåde: Oxiderer nabostillede OH-grupper i glukogen. Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Mayers sure hæmatein Dehydrering Oxiderer nabostillede OH-grupper i glukogen. Derved dannes aldehydgrupper.
Oxidation af OH-grupper: Lyon, Hans: Farvning af væv på basis af covalente bindinger og redoxprocesser, Bioanalytikeruddannelsen København, 1998.
Fremgangsmåde: Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Mayers sure hæmatein Dehydrering
Fremgangsmåde: Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Mayers sure hæmatein Dehydrering Schiff’s reagens laver kovalente bindinger til aldehydgrupper i glukogen.
Kovalent binding af Schiff’s reagens: Aldehydgruppe fra glukogen Ny kovalent binding Schiff’s reagens
Fremgangsmåde: Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Mayers sure hæmatein Dehydrering Hæver pH hvorved sulfolfonsyregruppen til det centrale C-atom fraspaltes.
Fremgangsmåde: Kernefarvning med Al-hæmatein. Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Mayers sure hæmatein Dehydrering Kernefarvning med Al-hæmatein.
Al-hæmatein: Bindinger af ”delvist kompleks karakter” Kompleksbindinger Phosforgruppe i DNA-kæde
Fremgangsmåde: Hæver pH til 7. Dette fraspalter en H+ fra hæmatein. Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Mayers sure hæmatein Dehydrering Hæver pH til 7. Dette fraspalter en H+ fra hæmatein. Hæmatein skifter farve fra vinrød til blå.
Resultater: Glycoproteiner, neutrale proteoglycaner og glykogen – røde Basofile granulocytter - røde Kerner - blå
Kontroller: Ved rutine farvning medtages ikke kontroller.
Kommentarer: Sure glycosaminoglykaner (GAG’er) danner ikke aldehydgrupper, da periodsyre frastødes af de mange negative ladninger.
Litteratur: Lyon, Hans: Farvning af væv på basis af covalente bindinger og redoxprocesser, Bioanalytikeruddannelsen København, 1998, side 3-8. Prentø, Poul: Vævsfarvning og farvningsmekanismer, Bioanalytikeruddannelsen København, 1998, side 35, 56-57. Farveopskrift fra speciallab. www.stainsfile.info