1 Feulgen’s nuclear reaktion Formål: Påvisning af DNA
2 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre10 minutter Rindende vand Schiff’s reagens15 minutter Rindende vand5 minutter Dehydrering
3 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Dehydrering Sur hydrolyse af purin- N-C1-pentose glycosidbindinger.
4 Puriner: Adenin (A) Guanin (G)
5 Sur hydrolyse: (ikke afstemt) Purin-N-C1- pentose glykosidbinding Apurinsyre
6 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Dehydrering
7 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Dehydrering Schiff’s reagens laver kovalente bindinger til frie aldehydgrupper i deoxiribose.
8 Dannelse af frie aldehydgrupper: Halvacetal Aldehyd
9 Kovalent binding af Schiff’s reagens: Schiff’s reagens Aldehydgruppe fra ribose Ny kovalent binding
10 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Dehydrering Hæver pH hvorved sulfolfonsyregruppen til det centrale C-atom fraspaltes.
11 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Dehydrering
12 Resultater: Kerner magenta (pink)
13 Kontroller: Ingen. Vævet er en kontrol i sig selv.
14 Kommentarer: RNA farves ikke, da det nedbrydes til nukleotider under den sure hydrolyse.
15 Litteratur: Lyon, Hans: Farvning af væv på basis af covalente bindinger og redoxprocesser, Bioanalytikeruddannelsen København, 1998, side Farveopskrift fra speciallab.