Trichrom-farvning (trichrom: tre farver) Formål: Påvisning af bindevæv

Fremgangsmåde: Afparaffinering Kogning 10 minutter Lillie Weigert’s jernhæmatein 10 minutter Rindende vand 5 minutter Picrinsyre/Orange G 1 minut Rindende vand 5 dyb Ponceau/syrefuchin-opløsning 3 minutter 1% fosforwolframsyre 1 minut 1% anilinblå i 1% eddikesyre 3 minutter Dehydrering

Fremgangsmåde: Åbner vævet op Afparaffinering Kogning Lillie Weigert’s jernhæmatein Rindende vand Picrinsyre/Orange G Ponceau/syrefuchin-opløsning 1% fosforwolframsyre 1% anilinblå i 1% eddikesyre Dehydrering Åbner vævet op Intensivere farverne og fremhæve kontrasten mellem forskellige vævskomponenter.

Fremgangsmåde: Kernefarvning med jernhæmatein. Afparaffinering Kogning Lillie Weigert’s jernhæmatein Rindende vand Picrinsyre/Orange G Ponceau/syrefuchin-opløsning 1% fosforwolframsyre 1% anilinblå i 1% eddikesyre Dehydrering Kernefarvning med jernhæmatein.

Jernhæmatein Kompleksbindinger Bindinger af ”delvist kompleks karakter” Phosforgruppe i DNA-kæde

Fremgangsmåde: Hæver pH til 7. Dette fraspalter en H+ fra hæmatein. Afparaffinering Kogning Lillie Weigert’s jernhæmatein Rindende vand Picrinsyre/Orange G Ponceau/syrefuchin-opløsning 1% fosforwolframsyre 1% anilinblå i 1% eddikesyre Dehydrering Hæver pH til 7. Dette fraspalter en H+ fra hæmatein. Hæmatein skifter farve fra vinrød til blå.

Fremgangsmåde: Anionfarvestoffer. Afparaffinering Kogning Lillie Weigert’s jernhæmatein Rindende vand Picrinsyre/Orange G Ponceau/syrefuchin-opløsning 1% fosforwolframsyre 1% anilinblå i 1% eddikesyre Dehydrering Anionfarvestoffer. Farvestoffernes molekylestørrelse og vævets gennemtrængelighed er afgørende for hvilke vævskomponenter der bliver farvet og af hvilke farvestoffer de farves.

Farvestoffer: Bindes til proteiner ved hydrofob interaktion upolære bindinger hydrogenbindinger ionbindinger Phosperwolframsyre ligger sig omkring proteintråde i cytoplasma, herved er det kun kollagen, der farves af anilinblå

Resultater: Kollagene og retikulære tråde – blå Fibrin – orangerødt Erythrocytter – gule Muskler – røde Kerner - blårøde

Kontroller: Der anvendes rutinemæssigt kontrolsnit. Leversnit til leverfarvninger Tarm når der farves i øvrigt.

Kommentarer: Alternativ til mikrobølger er forbehandling i Bouins fixsativ natten over. Det fungerer som en form for sekundær fiksering, som skulle intensivere farverne og dermed fremhæve kontrasten mellem forskellige vævskomponenter.

Litteratur: Lyon, Hans: Farvning af væv på basis af covalente bindinger og redoxprocesser, Bioanalytikeruddannelsen København, 1998. Farveopskrift fra speciallab. www.stainsfile.info