1 Feulgen’s nuclear reaktion Formål: Påvisning af DNA.

Præsentationer af emnet: "1 Feulgen’s nuclear reaktion Formål: Påvisning af DNA."— Præsentationens transcript:

1 1 Feulgen’s nuclear reaktion Formål: Påvisning af DNA

2 2 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre10 minutter Rindende vand Schiff’s reagens15 minutter Rindende vand5 minutter Dehydrering

3 3 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Dehydrering Sur hydrolyse af purin- N-C1-pentose glycosidbindinger.

4 4 Puriner: Adenin (A) Guanin (G)

5 5 Sur hydrolyse: (ikke afstemt) Purin-N-C1- pentose glykosidbinding Apurinsyre

6 6 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Dehydrering

7 7 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Dehydrering Schiff’s reagens laver kovalente bindinger til frie aldehydgrupper i deoxiribose.

8 8 Dannelse af frie aldehydgrupper: Halvacetal Aldehyd

9 9 Kovalent binding af Schiff’s reagens: Schiff’s reagens Aldehydgruppe fra ribose Ny kovalent binding

10 10 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Dehydrering Hæver pH hvorved sulfolfonsyregruppen til det centrale C-atom fraspaltes.

11 11 Fremgangsmåde: Afparaffinering 16 % saltsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Dehydrering

12 12 Resultater: Kerner  magenta (pink)

13 13 Kontroller: Ingen. Vævet er en kontrol i sig selv.

14 14 Kommentarer: RNA farves ikke, da det nedbrydes til nukleotider under den sure hydrolyse.

15 15 Litteratur: Lyon, Hans: Farvning af væv på basis af covalente bindinger og redoxprocesser, Bioanalytikeruddannelsen København, 1998, side 4-10. Farveopskrift fra speciallab. www.stainsfile.info